PCR实验室设计的六大重点!

2023-04-13 22:44:19 admin 7

如何建一个标准的PCR 实验室? PCR实验室如何设计规划才堪称专业? PCR实验室管理又有哪些注意要点? 本文让你以0开始搞PCR实验室规划设计。标准的PCR 实验室分为四个区域,分别为:

1.试剂配制区

2.样品处理区

3.核酸扩增区;

4.产物分析区:

ps:进入各工作区域必须严格按照单一方向进行,不同的工作区域使用不同的工作服,如不同的颜色。工作人员离开各工作区域时,不得将工作服带出

、PCR实验室平面布局

各区的功能分别为:

试剂准备区:扩增试剂的配制、分装和保存。

样品处理区:样品登记、分装,核酸提取、保存和加样。

扩增产物分析区:扩增产物的测定、结果分析、登记及报告。

扩增前区与扩增后区应严格分开,须使用不同的房间,两区之间最好有一定的间隔.

使用商品化试剂盒可在样品处理区进行少量试剂配制。

在满足下列操作和清洁处理要求的前提下样品处理区和试剂准备区可设在同一房间内:

在生物安全柜内操作。

每个实验人员、实验组分别使用各自的试剂及耗材.

盛放污染材料的器川密封并一次性使用。

用有效的方法对操作区域和共享器具在实验前后进行清洁及消毒

、PCR实验室建设规划要点

1.主体结构

主体为彩板、铝合金型材,室内所有阴角、阳角均采用铝合金50内角铝,从而解决容易污染、积尘、不易清扫等问题,结构牢固,线条简明,美观大方,密封生好子

2.标准的三区分隔和气压调节

将PCR过程分成试剂准备、标本制备和CR扩增检测三个立的实区,整个区城有一个整体 中走廊每个独立实验区设置有中区,同时各区通过气压调节,使整PCR实

验过程中试剂和标本免受气溶胶的污染并降低扩增产物对人员和环境的污染。

可打开缓中区1,缓中区工和PCR 护增区的排风扇往外排气,在实验区的外墙上和各扇门上都安装有风量可调的回风口,空气过同风口向室内换气。

3.消毒

在三个实验区和三个缓冲区顶部以及传送窗内部安装有紫外灯,供消毒用在试剂准备区和标本制备区还设置移动紫外线灯,对实验卓进行局部消毒4.机械连锁不锈钢传递窗

试剂和标本通过机械连锁不锈钢不建议使用电子连锁方式)传递窗传递,保证试剂和标本在传递过程中不受污染(人物分流)5.地面

地面建议使用PC卷材地面或自流坪地面,整体性好。便于进行清扫,耐腐。没有条的也可采用水磨地面,或大块的瓷传至少800mmx800mm) 接缝需要小于2mm。

5.地面

地面建议使用PVC卷材地面或自流坪地面,整体性好。便于进行清扫,

耐腐饨。

没有条件的也可采用水磨石地面,或大块的瓷砖

(至少800mmx800mm) 接缝需要小于2mm

6.照明

灯具要选用净化灯具,能达到便于清洗、不积尘的特点.

ps: 在建设的过程中应注意:

。规范的安装流程和全面的服务流程

。严格按照规范科学设计的安装流程

安装前需要确定以下安装条件,如:电电压,电源进线置,电活网络线进线置,进水水压,最小安装空间,地面平整度,通风孔、进水管和下水管的位置等,理想状态的

空间尺寸和通风口尺寸。

三、设计要点

PCR实验室可以是分散州式,也可以是组合形式,完成一PCR实验,通常应经过试剂制、样品处理,核扩增及产物分桥四个实过程,若实验工艺需要,还应增加样品粉

碎过程。

1.分散形式PCR实验室

所谓分散形R实验室,是指完成上述实过程的实验用房彼此相距较远,呈分散布置形式。对于这种布置形式的PCR实验室,由于各个实验之间不易相互干扰,因此无需特

殊条件要求。2.组合形式PCR实验室所情组合形式PCR实验室,是指完成PCR四实验过程的实验用房相邻布置,成独立实验区的形式。对于组合形式PCR实验室,由于各个实验间集中布置,容易造成相互干扰,因此,对总体布局以及屏障系统具有一定的要求。各室在入口处设缓冲间,以减少室内外空气交换。四、PCR实验室主要设备

1.试剂准备区

仪器设备主要有冰箱、超净台、加样器、混匀器、天平和离心机等,加样器、,天平除了要专用外,还应有定期校准。试剂分装应在超净台中进行扩增反应混合液应使用分子生物学级的,试剂制备好后应有质检: 一是否有污染、二是检测试剂的扩增效果。2.标本制备区

仪器设备主要有生物安全柜、加样器、离心机、温育仪、混匀器等

3.扩增区扩增区的主要仪露是核的广增仪、超争台、微量加样器、离心机、可移动外灯。扩增仪需进行校准,并配备UPS电源,以防止由于电压的波动,停电对广增效果的影响,4.分析区

本区所使用的仪器设备有酶标仪、洗板机、加样器和水浴箱等洁净实验区的中间部分面积不能超过主实验室的八分之一,这是有规定的.

五、一些琐碎的、不可忽略的设计

1.实验室空调通风系统设计及压力控制

PCR实验室并没有严格的净要求,但是为避免各个实验区域间交叉污染的可能性,宜采用全送全排的气流组织形式。同时,要严格控制送、排网的比例以保证各实验区的压力要求。

2.污染的预防与控制

PCR实验室设计的核心问题是如何避免污染,在实际工中,常见的有以下几种污染类型:扩增产物的污染,天然基因组DNA的污染剂的污染以及标本间的污染,由于一发生污染,实验就必须停止,直到到污染源为止,而且实验结果必须作废,需重新进行实验,所以发生污染后再围绕实验室来寻找污染源不但耗时而且数班,浪费人力物力。因此要避免污染,首先应是预防,而不是排排除

六、PCR实验室不可缺少的严格管理

,严格控制进出实验室的人员。与实验无关的人员不得随意进出实验室,有条件的情况下要设置独立的通道和进出整个实验区的门.

2.尽量减少在实验区内不必要的走动以减少交叉污染的可能性。

3扩增产物分析区是最主要的广增产物污染来源,废液不能在实验室中倾倒,必须经消毒液漫泡消毒后在远离实验室的地方弃掉,用过的吸头等一次性材料也应经消毒液漫泡消

毒后统一处理,如焚烧等。

4.扩增产物分析区可能会用到某些可致基因突变和有毒物质,应特别注意实验人员的安全防护。5,完备的实验室配套设施,完备的实室套设施是保证实验工作的以要条件,应根各个实验室实验内容的不同配备相应的设和仪器,如超争工作台、离心机、加样器等


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